1、操作方法：

21日龄健康肉鸡20只，随机分为4组，每组5只。第1组为空白对照组，不进行肝损伤；第2组为阳性对照组，进行肝损伤而不进行药物治疗；第3组为用药小剂量组，进行肝损伤并进行丙冬甘宁混饮（0.5%）；第4组为用药大剂量组，进行肝损伤并进行丙冬甘宁混饮（1%）。

2、急性肝损伤模型的建立：

以CCL4（分析纯级，99.5%）及食用花生油按2﹕1混合，按5ml/Kg对试验鸡肌肉注射，间隔2天后再次按5ml/Kg进行肌肉注射。

3、丙冬甘宁的混饮：

第3、4组试验鸡按不同比例混饮丙冬甘宁，连续混饮1w后，进行肝损伤（对照组同时进行），肝损伤1w后（期间继续丙冬甘宁的混饮），剖检，并进行血清学检测。

4、临床和组织病理学检测

丙冬甘宁开始混饮后，每日记录各组的临床症状，肝损伤1w后，剖检，记录肝脏病变，并采集肝组织，制作石蜡切片，进行病理学检测。

5、结果：

急性肝损伤的临床表现

首次CCL4肌肉注射1天后，与空白对照组相比，2、3、4组试验鸡表现精神沉郁，缩头，羽毛蓬乱，食欲、饮欲下降，第2天症状明显减轻，食欲、饮欲恢复，第3天再次进行CCL4肌肉注射后，2、3、4组试验鸡精神极度沉郁，食欲废绝，蹲伏笼内，第4天2组死亡1只，至第6天3、4组试验鸡精神逐渐恢复，食欲提升，而2组未见好转，第8天扑杀全部试验鸡，剖检。

A空白对照组B阳性对照组C用药小剂量组D用药大剂量组

病理解剖图示，2组试验鸡中3只肝脏肿大，边缘可见白色坏死灶，1只肝脏萎缩，萎缩肝脏呈土黄色，质地脆硬，表面分布多量出血点，并有散在白色结节；3组试验鸡2只肝脏肿大，颜色变淡，2只未见肉眼可见病变；4组试验鸡2只肝脏肿大，颜色稍变淡，2只未见肉眼可见病变。

A空白对照组B阳性对照组C用药小剂量组D用药大剂量组

由病理组织变化图可见，空白对照组肝脏结构清晰，未见肉眼可见病理变化；阳性对照组肝细胞排列紊乱，肝脏结构消失，大量肝细胞细胞核浓缩、碎裂，肝细胞胞浆内出现形状不则、大小不一的空泡，细胞间隙有红细胞浸润；用药小剂量组部分肝细胞胞浆内出现空泡，核浓缩、碎裂；用药大剂量组少量肝细胞出现空泡变形，核浓缩、碎裂，但肝脏结构较清晰。

对肝脏谷草转氨酶和谷丙转氨酶的影响

进行肝损伤前，各组分别分离血清进行天冬氨酸转移酶（AST）丙氨酸转移酶（ALT）检测，肝损伤1w后，再次分离血清，进行上述指标的检测。

各组试验鸡在进行肝损伤前血清AST、ALT含量差异不显著。肝损伤1w后，2、3、4组血清AST含量显著高于对照组（P＜0.01），其中2组最高，3、4组低于2组，但差异不显著（P＞0.05），；而2、3、4组血清ALT含量均高于对照组，其中2组最高（P＜0.01），4组次之（P＜0.05），3组略高（P＞0.05），但与2组相比，3、4组ALT含量显著降低（P＜0.05）。

6、实验结论:

AST、ALT是肝功检测的主要指标，当肝细胞受损即肝脏发生病变时，肝细胞内AST、ALT释放进入血液，导致血液中AST、ALT含量升高。

在丙冬甘宁对急性肝损伤的防治作用试验中，通过临床症状观察，病理解剖和组织学检查显示，CCL4造成鸡急性肝损伤后，与阳性对照相比，2个丙冬甘宁用药组血清AST、ALT显著下降，肝脏发生病变较轻微，肝脏组织结构未被大规模破坏，这说明丙冬甘宁对鸡肝损伤具有防治作用。